紫外可見分光光度計的工作原理是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
作為一種精密儀器，紫外可見分光光度計在運行工作過程中由于工作環境，操作方法等種種原因，其技術狀況必然會發生某些變化，可能影響設備的性能，甚至誘發設備故障及事故。因此，分析工作者必須了解分光光度計的基本原理和使用說明，并能及時發現和排除這些隱患，對已產生的故障及時維修才能保證儀器設備的正常運行。
在啟動
紫外可見分光光度計之前，使用者需要將樣品室內存放的防潮劑取出，當設備在進行正常運轉時，請勿開啟樣品室蓋，對于比色皿當中的液體，比較理想的占比為總體積的60-80%，切記不要太多，以防液體外泄腐蝕儀器。而在正常檢測時，需保證比色皿保持干凈，內壁上液滴需要使用專業的紙進行擦拭，千萬不能使用手進行直接的擦拭，容易對使用人員的手造成傷害，甚至造成安全事故。
除此之外，在設備使用過程中，嚴禁把液體溶劑放置于儀器的表層上，如果出現液體外泄的情況，一定要保證進行及時的清潔處理。當檢測完畢之后，需要及時將比色皿內的液體處理掉，使用蒸餾水將其清理干凈，同時倒置進行晾干處理。后需要將儀器的電源關閉，把防潮劑放入到樣品室內，做好防塵處理，等到管理人員同意方可離去。
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